Linker hidrofil AEEA-AEEA

Agregarea ADC și eliminarea rapidă sunt principalele obstacole care conduc la imunogenitate ridicată, eficacitate scăzută și eșecul lotului. Introducerea linkerelor hidrofile (care conțin unități PEG, cum ar fi AEEA-AEEA) este o strategie eficientă pentru a aborda aceste două probleme.
The mechanism for reducing aggregation: The driving force for ADC aggregation is mainly the mutual attraction between hydrophobic drug molecules. When DAR>4, multiple drug molecules concentrate on the surface of the antibody, forming a "hydrophobic plaque". Hydrophilic PEG linkers, such as AEEA-AEEA, prevent aggregation through the following methods: ① Hydration layer repulsion: PEG chains bind a large number of water molecules, and each EO unit binds 2-3 H ₂ O, forming a hydration layer with a thickness of about 0.5-1 nm/unit. The total thickness of the hydration layer contributed by two AEEA units (four EO) is about 2 nm, which is sufficient to form an effective barrier between drug molecules (repulsive energy~3-5 kT, far greater than hydrophobic attraction~1-2 kT). ② Conformal entropy repulsion: The flexible conformation of PEG chains reduces their entropy during compression, generating entropy elastic repulsion and further resisting aggregation. The experiment showed that using AEEA-AEEA ADC (DAR=6) at a concentration of 5 mg/mL, the aggregation rate (SEC-HPLC detection of HMW aggregates) was less than 3%; The control without PEG linker (DAR=4) had aggregates>15%.
Mecanismul de întârziere a clearance-ului: receptorii de clearance de pe celulele Kupffer și celulele endoteliale sinusoidale din ficat, cum ar fi domeniile specifice ale anticorpilor de recunoaștere a receptorului de manoză SR-B1 și receptorului de manoză MR. Încărcarea hidrofobă a medicamentelor pe suprafața anticorpilor expune regiunile hidrofobe, sporind afinitatea pentru eliminarea receptorilor. Lanțurile PEG hidrofile ale AEEA-AEEA pot „masca” în mod eficient aceste regiuni hidrofobe. Cercetările au arătat că ADC care utilizează linkerii PEG reduce absorbția hepatică cu 50-60% în comparație cu grupul de control fără PEG, iar rata clearance-ului plasmatic scade de la 12 ml/h/kg la 6 ml/h/kg. Timpul de înjumătățire-a ciclului a fost prelungit de la 3 zile la 7 zile într-un model de șoarece. În plus, hidrofilitatea reduce, de asemenea, riscul de legare la anticorpii anti PEG. Când lungimea PEG este moderată, imunogenitatea dimerului AEEA este mult mai mică decât cea a PEG-ului cu lanț lung, cum ar fi PEG2000.
Sinergia formulei: linkerii hidrofili simplifică, de asemenea, dezvoltarea formulării - menținând stabilitatea fără a fi nevoie de concentrații mari de agenți tensioactivi. În formulările liofilizate, agregarea ADC care conține AEEA-AEEA după reconstituire este mai mică de 1%, depășind cu mult standardul din farmacopee (<5%). Therefore, hydrophilic PEG linkers have become a "standard" design element for ADC stability and long cycling.